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    關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清的五大問題
    點擊次數(shù):1792 更新時間:2015-10-09
     問題一:如何保管標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清
      對于準(zhǔn)綿羊血清的保存,小編建議長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
      問題二:如何解凍標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清
      標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
      問題三:如何處置血清凍結(jié)后的絮狀沉積物
      當(dāng)血清凍結(jié)后出現(xiàn)了絮狀沉積物,我們應(yīng)該仔細分析出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因,一般來說,zui通常的原因就是血清中脂蛋白的變性構(gòu)成的,而血纖維蛋白(構(gòu)成凝血的蛋白之一)在血清凍結(jié)后,也會存在于血清中,亦是構(gòu)成血清沉積物的主要緣由之一。想要去除血清凍結(jié)后的絮狀沉積物,我們可以將血清分裝至無菌離心管中,以400g略微離心,上清液即可接著參加培育基內(nèi)一同過濾。
      問題四:如何防止絮狀沉積物出現(xiàn)
      防止絮狀沉積物出現(xiàn)的方法就是注重正確的血清凍結(jié)進程,并盡量防止滅活血清及長時刻的將血清置于高溫環(huán)境中。
      問題五:為什么要做熱滅活
      熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多。
      試驗顯現(xiàn),通過正確處置的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需求的。通過處置的血清對細胞成長只要細小的推進,或*沒有任何效果,乃至一般由于高溫處置影響了血清的質(zhì)量,而構(gòu)成細胞成長速率的下降。而通過熱處置的血清,沉積物的構(gòu)成會明顯的增多,這些沉積物在倒置顯微鏡下調(diào)查,像是“小黑點”,常常會讓研討者誤以為是血清遭受污染,而把標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清放在3 7℃環(huán)境中,又會使此沉積物更增多,使研討者認(rèn)為是微生物的割裂擴增。
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