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  • 上海遠慕生物科技有限公司

    上海遠慕:糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒說明書
    點擊次數:1391 更新時間:2016-09-09

        糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒說明書

        一、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒簡介

        糖原染色是病理學中常規的染色方法之一,McManus在1946年zui先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。

        過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基,使之變為二醛,醛與Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。

        本糖原PAS染色試劑盒的特點:采用Leagene*配方技術,大大增強了染色效果;性能穩定,特異性強;操作簡捷,僅需1h左右。

        二、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒組成

        試劑(A):過碘酸溶液50ml100ml500ml4℃避光

        試劑(B):SchiffReagent50ml100ml500ml4℃避光

        試劑(C):Lillie-Mayer蘇木素染色液50ml100ml500mlRT避光

        試劑(D):酸性乙醇分化液50ml100ml500ml

        三、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒主要成分:

        試劑(A):主要由過碘酸等組成。

        試劑(B):主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉等組成。

        試劑(C):主要由蘇木素、乙醇等組成。

        試劑(D):主要由稀酸、乙醇等組成。

        自備材料:

        1、10%的福爾馬林

        蒸餾水或去離子水

        3、95%乙醇

        4、無水乙醇

        5、封片劑

        四、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒操作步驟(僅供參考)

        1、常規固定,常采用10%的福爾馬林,常規脫水包埋。

        2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。

        3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。

        4、置于過碘酸溶液中,室溫放置5~8min,一般不宜超過10min.

        5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。

        6、樣本放入SchiffReagent,置于室溫陰暗處,浸染10~20min。

        7、自來水沖洗10min。

        8、樣本置于Lillie-Mayer蘇木素染色液中,染細胞核1~2min。

        9、酸性乙醇分化液分化。

        10、自來水沖洗10~15min后,更換雙蒸水清洗,使其返藍。

        11、逐級常規乙醇脫水。

        12、二甲苯透明。

        13、中性樹膠封固。

        五、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒染色結果:

        PAS反應陽性物質(糖原或多糖)紅色或紫紅色

        細胞核藍色

        細胞質深淺不一的紅色

        備注:顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間的長短。

        陰性對照(可選):

        1、對照切片可以用唾液,取唾液片(過濾后用)處理30~60min后,與其他切片共同入過碘酸溶液。

        2、對照片可以淀粉酶,取淀粉酶1g于雙蒸水或PBS(pH5.3)100ml,處理30~60min后,與其他切片共同入過碘酸溶液。

        3、如果對照片采用其自身樣本,對照片不經過碘酸溶液這一步,直接入SchiffReagent。染色結果:對照片呈陰性反應,無紫紅色顆粒。

        六、注意事項:

        1、切片脫蠟應盡量干凈,否則影響染色效果。

        2、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以18~22℃zuijia。

        3、試劑(A)、(B)應置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前,

        提前30min取出恢復到在室溫后,避光暗處使用。

        4、酸性乙醇分化液應經常更換新液,其分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和酸性乙

        醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。

        5、在過碘酸溶液和SchiffSchiffReagent中作用時間非常重要,該依據切片厚薄、組織

        的類別等決定。

        6、本試劑盒常用于常規組織切片染色,對于真菌、細胞、極其薄的切片,建議采購糖原PAS染色試劑盒(細胞真菌),因為其過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染。7、冷凍切片染色時間盡量要短。

        8、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

        七、有效期:6個月有效。

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