上海遠慕生物詳細為您介紹miRNA提取試劑盒操作說明書，用途，注意事項，品牌，價格等，本司是美國Omega品牌代理商，代理旗下所有產品，部分系列有：96孔板RNA 提取試劑盒I，96孔板病毒總RNA純化試劑盒，磁珠病毒ＤＮＡ/ＲＮＡ純化試劑盒，磁珠組織RNA提取試劑盒，RNA室溫保護液，RNA保護液，微量病毒ＤＮＡ／ＲＮＡ共提取試劑盒，其他系列等，價格實惠，訂購！
名稱：miRNA提取試劑盒
品牌：Omega
供應商：上海遠慕
用途：從細胞、動物、植物組織中同時提取小分子RNA或大分子RNA
miRNA提取試劑盒的提取目前主要采用兩種方法：Trizol法和離心柱法，操作步驟極為簡單、無需過柱、去大RNA/DNA、再沉淀等復雜的步驟，即可獲得高產量、高純度、不含大RNA的小RNA。適用于高通量提取，2h內可完成24個樣品的提取工作。應用該miRNA提取試劑盒提取的小RNA（Small RNA）中，長度在15～200nt范圍的RNA>90%，基本不含有大RNA和DNA。
RNA提取試劑盒工作原理：
首先采用一種包含非離子型洗滌劑的特殊細胞裂解緩沖液進行樣品均質化。由于蛋白質保持完整，因此可取一部分裂解液直接用于常規蛋白質分析應用。剩余裂解液則采用了結合有機和固相提取優勢、同時避免二者劣勢的操作程序進行RNA的分離。
1.用1ml RNA-Solv® Reagent裂解細胞或組織（50-100mg植物組織），勻漿；
2.將勻漿液在室溫下靜置2-3min ；
3.向勻漿液中加入200μLlvfang，蓋緊離心管的蓋，劇烈振蕩15s，冰浴10min；
4.4℃，12000g，15min離心。勻漿分離為下層的有機相和上層的水相。RNA 留在上層水相中；
5.轉移不超過80%體積的上清至一新的2.0ml離心管中，加入 1/2體積的無水乙醇，振蕩混勻；
6.渦旋振蕩第5步中的混合物，然后將混合物全部轉移至2mL HiBind® RNA Mini column中（每次吸取不超過700μL液體，多余700μL時逐次加入）。室溫下10000*g離心30-60s，轉移流出液至新的2ml離心管中（注意記錄轉移出的體積），以用于分離小RNA。
7.加入0.9倍流出液體積的無水乙醇至第6步的離心管中，渦旋振蕩混勻。取 一個HiBind® RNA Mini column，置于一個新的2ml收集管中；
8. 取第7步的混合物加入吸附柱中，棄流出液；
9. 重復步驟8，將剩余樣品加入吸附柱中，10000g，30-60s，棄流出液；
10. 將吸附柱放在同一個2ml收集管中，添加500μl RWB Wash Buffer， 10000g，30-60s，棄流出液，重復使用收集管在第11步；
11. 再次添加500μL RWB Wash Buffer洗柱，如第10步。10000g，30-60s離 心，棄流出液。使用一空收集管，13000g，2min，來*干燥HiBind®matrix；
12.洗脫miRNA。轉移吸附柱至一新的1.5ml離心管中并在膜上加入15-30μL DEPC水（70℃預熱效果更佳）。室溫靜置5min，然后 13000g 1min 離心。如果預期的RNA超過20μg，進行二次洗脫。
標簽：RNA提取試劑盒 miRNA提取試劑盒
