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  • 上海遠慕生物科技有限公司

    總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)
    點擊次數:1797 更新時間:2017-11-13

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    中文名:總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)

    供應商:上海遠慕

    規格:120T

    有效期: 12個月有效。蛋白標準配制成溶液后應-20℃凍存。 

    用途:定量檢測血清、組織樣本中總蛋白含量。

    本產說明:酶標儀檢測540nm處吸光值。

    系列:生化檢測

    適用范圍:本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

    總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)

    總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測定。雙縮脲反應的原理是在呈藍色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復合物,呈紫色,所產生的顏色密度與參與反應肽鍵數成比例。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。雙縮脲法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響。

     

     

    總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)操作步驟:

    1.取1ml蛋白標準配制液或稀釋液加入到蛋白標準中,充分溶解后配制成20mg/ml的 蛋白標準溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標準溶液應-20℃保存。亦可按自己試驗要求繼續進行稀釋,如稀釋至1mg/ml。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解白蛋白標準品的稀釋液。

    2.鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,離心,取上清待檢。

    3.TP加樣操作,按下表依次加入試劑:

    總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)操作步驟

    4.混勻,孵育。   

    5.準孔和各待測孔的吸光度。  

    6.當遇到渾濁或溶血樣本等,可設”樣本空白孔”:取待測樣品加入雙縮脲空白試劑,以雙縮脲空白試劑調零,讀取樣本空白孔吸光度。用待測孔吸光度減去標本空白孔吸光度后的凈吸光度,計算總蛋白濃度。

     

     

    總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)注意事項:

    1.蛋白標準粉末溶解于蛋白標準配制液后,即獲得蛋白標準原液,該原液中含有防腐劑, 不影響后續檢測,該蛋白標準原液-20℃長期保存。  

    2.待測蛋白和蛋白標準加入雙縮脲試劑后,如果發現檢測效果不佳,可以室溫放置1h或 60℃放置15min,顏色會隨著時間的延長不斷加深。  

    3.測定標準曲線時發現隨著標準品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化,可能的原因 是樣品中含有銅離子螯合劑。  

    4.如果沒酶標儀,也可以使用分光光度計測定。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個 試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少。  

    5.檢測中發現所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應適當透析或稀釋樣品。  

     

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