瓊脂糖凝膠6B說(shuō)明書由上海遠(yuǎn)慕提供介紹，本司專業(yè)代理銷售：瓊脂糖凝膠CL-4B，瓊脂糖凝膠CL-6B，瓊脂糖凝膠4FF，瓊脂糖凝膠6FF，瓊脂糖凝膠CL-2B及其他系列，我們還詳細(xì)講述瓊脂糖凝膠2B特點(diǎn)相關(guān)咨訊，本司的產(chǎn)品滿足于客戶需求，價(jià)格便宜，訂購(gòu)!
瓊脂糖凝膠6B參數(shù)說(shuō)明：
中文名：瓊脂糖凝膠6B
英文名：Sepharose 6B
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
基質(zhì)：6%高度交聯(lián)瓊脂糖凝膠
規(guī)格：5g
操作溫度：4-40℃
zui大流速：300cm/h
性狀：白色膠體
保存溫度：4-8℃
瓊脂糖凝膠6B分離范圍：10,000-4 ×106
類型：凝膠過(guò)濾填料,凝膠層析介質(zhì)
用途：親和層析介質(zhì)
應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測(cè)定等
瓊脂糖凝膠6B
瓊脂糖凝膠6B操作步驟：
該環(huán)氧活化瓊脂糖凝膠介質(zhì)可以和含有氨基、巰基或羥基的親和配基的蛋白質(zhì)、多肽、糖等物質(zhì)偶聯(lián)。具體的偶聯(lián)方法如下(偶聯(lián)BSA為例)：
洗滌：用10-20倍膠體積的去離子水沖洗保存存儲(chǔ)液中的環(huán)氧活化膠，除去存儲(chǔ)液，抽干;
偶聯(lián)：稱取200mg BSA，溶于10ml 0.1M pH 9.0碳酸鈉緩沖液，加入到洗滌抽干的活化膠中，在37℃搖床上振蕩12-24h偶聯(lián)，偶聯(lián)完畢后將料液轉(zhuǎn)移到砂芯漏斗中抽干;
封閉：將抽干的偶聯(lián)BSA的膠加入到100 ml三角瓶中，加入30 ml 1 mol/L乙醇胺溶液。攪拌速度120 rpm，37 ℃條件下反應(yīng)4h，然后將料液轉(zhuǎn)移到砂芯漏斗中抽干。
清洗：然后依次用5倍的去離子水、0.1 M含0.5M NaCl的乙酸-乙酸鈉緩沖液(pH 4.0)、去離子水、0.1M含0.5M NaCl的硼酸-四硼酸鈉緩沖液(pH 8.0)和去離子水充分洗滌后，抽干。
保存：保存于4℃、20%乙醇溶液中。
瓊脂糖凝膠6B注意事項(xiàng)：
1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類似，但是反應(yīng)的條件例如：配基加入量，反應(yīng)時(shí)間，反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;
2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液，但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。
瓊脂糖凝膠6B分離技巧:
1、分離時(shí)流速不可太快，切切不可心急，所謂欲速則不達(dá);接餾分時(shí)可開全速，節(jié)省時(shí)間。
2、柱子盡可能長(zhǎng)，葡聚糖凝膠柱長(zhǎng)的增加將極大地改善分離，所不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中，不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢(shì)兵力，打擊敵人。
3、餾分一定要接的細(xì)，可1/10，或1/20 個(gè)保留體積接成一餾分。
4、洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積，對(duì)特殊保留強(qiáng)的化合物，可洗脫5個(gè)保留體積。
5、鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20 分鞣質(zhì)
6、葡聚糖凝膠對(duì)黃酮類成分的分離效果，方法很成型，有大量文獻(xiàn)參考。
7、填料反復(fù)使用，每次用完，一般可用甲醇將柱子洗干凈，然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來(lái)，待用。暫時(shí)不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗，zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長(zhǎng)期不用時(shí)，可在以上處理基礎(chǔ)上，減壓抽干，再用少量乙迷洗凈抽干，室溫充分揮散至無(wú)醚味后，60～80°C干燥后保存。
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標(biāo)簽：瓊脂糖凝膠6B
