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  • 上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

    人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒操作步驟
    點擊次數(shù):1102 更新時間:2018-06-28

      上海遠(yuǎn)慕生物科技詳細(xì)為您介紹人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒操作步驟,用途,規(guī)格,保質(zhì)期,價格,品牌等詳情,本司提供ELISA試劑盒免費代測服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果,ELISA種屬有:大鼠ELISA檢測試劑盒,小鼠ELISA檢測試劑盒,人ELISA試劑盒,馬ELISA檢測試劑盒,羊ELISA檢測試劑盒,猴ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,狗ELISA檢測試劑盒,植物ELISA試劑盒,猴ELISA試劑盒,其他動試劑盒,訂購!

     

      【信息說明

      中文名稱:人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒

      中文別名:人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA kit

      供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

      規(guī)格:48t/96t

      保存:2~8℃

      有效期:6個月

      樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

      用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。

      特點:靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好.種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

      運(yùn)輸方式:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。

      檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本;例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

     

      【使用原理

      1、ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

      2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。

      3、在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。

      4、用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。

      5、此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

      6、由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

     

      【特點說明

      1、專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。

      2、靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。

      3、樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。

      4、結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。

      5、可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計用細(xì)胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。

      6、可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。

     

      【組織結(jié)構(gòu)

      1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

      2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

      3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

      4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

      5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

     

      【操作步驟

      1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      2、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

      3、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

      4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

      5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

      6、溫育:操作同3。

      7、洗滌:操作同5。

      8、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

      9、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

      10、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

     

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