蛋白質(zhì)注射液作為注射液的一種，現(xiàn)在已經(jīng)成為了新的研究熱點(diǎn)。與小分子化學(xué)品不同，其分子量較大且結(jié)構(gòu)復(fù)雜，產(chǎn)品質(zhì)量尤其是生物學(xué)活性易受各種因素影響且不太穩(wěn)定，故 <USP787>中將治療用蛋白質(zhì)注射液單獨(dú)進(jìn)行收錄，以對不溶性微粒進(jìn)行控制。
<USP787>與 <USP788>要求內(nèi)容基本一致，但是基于蛋白質(zhì)產(chǎn)品的特殊性，在實(shí)際操作中會遇到如下風(fēng)險：
、樣品規(guī)格小需要合并操作時易引入顆粒；
第二、特殊成分如穩(wěn)定劑，滲透壓，PH 調(diào)節(jié)劑等可能使樣品在轉(zhuǎn)移過程中產(chǎn)生蛋白質(zhì)聚集；
第三、溫度的影響，大多數(shù)的樣品均需冷藏貯存，直接與檢測管路接觸會發(fā)生熱傳遞；
第四、微粒的控制閾值，雖然 <USP787>中的微粒控制仍然設(shè)置在 10μm 和 25μm，但對于分子量較大的蛋白質(zhì)類藥物，分子之間聚集產(chǎn)生的顆粒，在免疫學(xué)方面存在嚴(yán)重隱患。
故 FDA 建議關(guān)于蛋白質(zhì)注射液檢測應(yīng)該檢測到 10μm 以下的更小的粒子。
蛋白質(zhì)注射液極易發(fā)生聚集且價值昂貴，一次測試所需要的容量僅 0.2-5.0 ml 且往往測試樣品眾多，這使小容量的樣品測試和自動化的手段測試變成了需求。
小容量的樣品測試解決方案：
針對檢測規(guī)格小的樣品的需要，AccuSizer 780 A2000 的微量進(jìn)樣系統(tǒng)能夠檢測 50μL 的樣品并且也能夠給出準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。請參照下表：
表一 不同上樣體積的樣品測試數(shù)據(jù)
| Volume（μL） | Counts | Counts/mL | St.dev | St.dev/mL | %RSD |
| 650 | 1923 | 2959 | 44 | 68 | 2.30% |
| 550 | 1601 | 2910 | 40 | 72 | 2.50% |
| 450 | 1383 | 3073 | 39 | 87 | 2.80% |
| 350 | 1029 | 2940 | 17 | 50 | 1.70% |
| 250 | 759 | 3035 | 26 | 104 | 3.40% |
| 150 | 464 | 3093 | 18 | 120 | 3.90% |
| 50 | 160 | 3193 | 10 | 194 | 6.10% |
如表一可以發(fā)現(xiàn)，從 650μL 至 50μL 所檢測的不同體積中，所得到的每毫升的顆粒數(shù)基本相同，其 RSD 值在 50μL 處依舊維持在 6.1%，可見 AccuSizer 780 系列儀器在微量進(jìn)樣的技術(shù)層面，依然可以提供的數(shù)據(jù)。
自動進(jìn)樣和測試的解決方案：
針對測試樣品眾多的需求，AccuSizer 可以搭載自動進(jìn)樣器，自動進(jìn)樣量為 60 個樣品/托盤，多可以搭載兩個托盤。
圖1 AccuSizer 搭載自動進(jìn)樣器
小粒子的檢測解決方案：
針對檢測更小粒子的需要，AccuSizer 780 A2000 在原有經(jīng)典的 LE 傳感器基礎(chǔ)上增加一個 FX-Nano 的傳感器，升級到了 A9000，將不溶性微粒檢測的下限從 0.5μm 下探至 0.15μm，專li的技術(shù)可以保證設(shè)備將來符合蛋白質(zhì)注射液的發(fā)展需求。也在生產(chǎn)和研發(fā)的過程中可以更好的監(jiān)測蛋白質(zhì)的聚集情況。
圖2 下限為 0.15μm 的數(shù)據(jù)呈現(xiàn)
藍(lán)色數(shù)據(jù)和紅色數(shù)據(jù)分別為過濾前后的數(shù)據(jù)，可以清楚地看到此蛋白質(zhì)在 200nm 左右的聚集有明顯減少。
