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  • 上海遠慕生物科技有限公司

    注意細節問題 才能決定ELISA試劑盒實驗的成敗
    點擊次數:778 更新時間:2019-05-22
        咱們在運用ELISA試劑盒96孔板的試驗測定的時分,常發現有“邊緣效應",也就是外周孔顯色較基地孔深。經研究證真實溫育中的熱力學梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體,在試驗室的常規ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學梯度。因而運用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地掃除“邊緣效應",而且可進步測定的重復性。
        ELISA試劑盒還有就是在試驗中,必定有運用微量加樣器參加樣本的步驟。提示留意:加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺出和發生氣泡。ELISA試劑盒太快的話無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易致使非特異吸附。濺出會對附近孔發生污染。出現氣泡則反響液界面有區別。所以,有時分一份標本用一樣的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,通常就是上述加樣及試劑的過錯所造成的。
        ELISA試劑盒實驗操作中,須特別注意一些細節問題,細節直接影響著試驗的成功與否,以下是ELISA試劑盒實驗八大忌諱,以供各位試驗君參考:
        一、如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先將樣本稀釋必定倍數(n倍)后再測定,核算時請zui終乘以稀釋倍數(×5×n)。
        二、ELISA試劑盒從冷躲環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝進密封袋中保留。
        三、嚴厲依照說明書的操縱進行,ELISA試劑盒實驗成果斷定有必要以酶標儀讀數為準。
        四、濃洗刷液可能會有結晶析出,ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。
        五、本試劑不一樣批號組分不得混用。顯色劑B請避光保留。
        六、ELISA試劑盒一切樣品,洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。
        七、各步加樣均應運用加樣器,并常常校正其正確性,以避免實驗誤差。一次加樣時刻*控制在5分鐘內,如標本數目多,引薦運用排槍加樣。
        八、封板膜只限一次性運用,以避免穿插污染。
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