<label id="3ldvz"></label>

<span id="3ldvz"></span>
<thead id="3ldvz"><optgroup id="3ldvz"></optgroup></thead>

  • <label id="3ldvz"><meter id="3ldvz"></meter></label>
    <span id="3ldvz"></span>
  • 上海遠慕生物科技有限公司

    微生物鑒定中常用的生化反應
    點擊次數:829 更新時間:2019-05-29

    試驗目的 血清分型

    標本 出血熱恢復期病人血清

    材料

    1、 毒株 漢灘病毒標準株 76-118,漢城病毒標準株 Seoul;

    2、標準血清 兔抗漢灘病毒、漢城病毒血清;

    3、空斑減少中和試驗常用試劑。

    步驟

    1、將待檢血清用牛血清Hanks 氏液稀釋成1:10,56℃滅活30分鐘;

    2、進一步2倍稀釋血清成1:20、1:40、1:80……,對照血清1:10稀釋;

    3、稀釋兩種病毒(在冰浴中進行)至含200pfu/ml;

    4、各連續稀釋度血清分別與200pfu/ml的兩種病毒液等量混合(各0.3ml),置37℃中作用1小時(每15分鐘振蕩一次);

    5、吸出各細胞培養孔中維持液;

    6、接種長滿單層的Vero-E6細胞(24孔板),每孔接種血清病毒混合液、標準血清對照及兩種病毒對照 ,每稀釋度兩孔,100ul/孔。37℃吸附1小時,每隔15分鐘搖動一次;

    7、加*層瓊脂糖覆蓋液(需冷置42℃左右),每孔1ml,室溫下待凝固,細胞面朝上,置37℃5%CO2孵箱培養7-9天;

    8、加第二層含中性紅瓊脂糖覆蓋液,1ml/孔,室溫下待凝固,細胞面朝上,置37℃5%CO2孵箱培養2-5天,從第二天開始觀察空斑數;

    9、抗體滴度的判定,以比病毒對照的空斑數中和或減少50%的血清zui高稀釋度倒數判為待檢血清中和抗體滴度;

    10、型別判定:根據同一份血清與兩種病毒的反應滴度不同來區分,如果一份血清與漢灘病毒 (或漢城病毒)反應的抗體滴度高于與漢城病毒(漢灘病毒)的抗體滴度4倍或以上,即判為漢灘病毒型,反之則為漢城病毒型。兩者滴度相差無幾時,則不好分型。不足4倍時亦不能定型。

    配方

    1、*層瓊脂糖覆蓋液

     

    2×Eagle MEM液50ml(Gibco-BRL)
    滅活胎牛血清10ml
    L-谷氨酰胺4ml(200mmol/L,100X)
    MEM非必需氨基酸1ml(Gibco,100x)
    1mol/L HEPES緩沖液2ml
    青鏈霉素1ml(青霉素10000u/ml,鏈霉素10000ug/ml)
    制霉菌素(一般可以不加)0.1ml
    臨用前配制,放入42℃水浴中,另取
    瓊脂糖0.6g(Sigma, Type II medium EEO)
    超純水34ml(適用于細胞培養的純化水)
    8磅高壓滅菌15min,置42℃水浴15min,加入上述配制的組分中,即可使用。

     

    2、第二層瓊脂糖覆蓋液 基本上同*層瓊脂糖覆蓋液,僅將滅活胎牛血清改為5ml,另加中性紅溶液1ml(333.0ug/L中性紅鈉鹽Gibco)。

    上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
    傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網址:m.ylcdjx.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
    主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
    點擊這里給我發消息
    手機:13310162040
    主站蜘蛛池模板: 啦啦啦高清视频在线观看免费| 久久www免费人成看国产片| 久久精品免费观看| 亚洲 自拍 另类小说综合图区| 亚洲欧洲无卡二区视頻| 两性刺激生活片免费视频| 中文字幕亚洲色图| 国产精品免费无遮挡无码永久视频 | AV在线播放日韩亚洲欧| 在线播放国产不卡免费视频| 亚洲国产精品狼友中文久久久| 看一级毛片免费观看视频| 全部免费毛片免费播放| 黄色a三级免费看| 久久久久亚洲精品男人的天堂| 免费人妻精品一区二区三区| jlzzjlzz亚洲乱熟在线播放| 在线看片免费人成视频播| 亚洲人成影院在线| 久久亚洲AV无码西西人体| jizz中国免费| 亚洲AV无码乱码在线观看富二代| 在线成人精品国产区免费| 666精品国产精品亚洲| 久久久久久免费视频| 亚洲精品女同中文字幕| 亚洲日本中文字幕一区二区三区 | 亚洲一区二区三区偷拍女厕| 久久免费精彩视频| ass亚洲**毛茸茸pics| 四虎影视在线永久免费观看| 九九久久精品国产免费看小说| 亚洲爆乳无码专区| 中国在线观看免费国语版| 九九精品国产亚洲AV日韩| 亚洲自偷自偷偷色无码中文| 在线a免费观看最新网站| 亚洲aⅴ天堂av天堂无码麻豆| 亚洲综合激情另类专区| 99久久99热精品免费观看国产| 亚洲综合av一区二区三区|