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    冷凍保存細胞的解凍與復(fù)蘇
    點擊次數(shù):983 更新時間:2019-06-06

    冷凍保存細胞的解凍與復(fù)蘇要點:慢凍快融

    (1)快速解凍。凍存細胞液氮中取出后,應(yīng)立即放入 37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在 1 分鐘內(nèi)全部融化(不要超過 3 分鐘)。

    (2)解凍操作過程動作要輕。由于冷凍保存過的細胞變得非常脆弱,不僅解凍速度要快,而且動作要輕。一般情況下,解凍后的細胞可直接接種到含*生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)(1ml 凍存細胞液加入到 25-30ml 新鮮*培養(yǎng)液中),24 小時后再用新鮮*培養(yǎng)替換舊培養(yǎng)液,以去除 DMSO。如果,細胞對冷凍保護劑特別敏感,那么,解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含*生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

    特別注意:

    (1)解凍時務(wù)必注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。,要帶手套,用鑷子將細胞冷凍管從液氮中取出,放入 37℃水浴中。切不可直接用手,以免凍傷。

    (2)冷凍管在水浴中解凍時,要將凍存管蓋子擰緊,確定擰緊后再投入水浴鍋中,注意液面不可超過凍存管蓋面,否則,易發(fā)生污染。

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