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    ELISA試劑盒實驗吸光度值發生衰減改怎么辦?
    點擊次數:1028 更新時間:2019-07-22

       根據比爾定律, 吸光度與試樣濃度成正比, 在不同的吸光度( Absorbance,Abs) 范圍內測量, 可引起不同的誤差.分析工作者應予高度重視.分析樣品濃度太低或濃度太高, 吸光度值超越了合適的范圍, 都不會得到滿意的結果.應使被分析樣品的吸光度范圍控制在一個合理的范圍內.


       試樣濃度不能太低, 吸光度不能太小, 信號過小, 光度噪聲的影響較大,使儀器的信噪比下降, 被測試的試樣濃度下限增高和分析誤差增大, 如測試huang曲霉素, 因儀器的噪聲太大, 測試數據從0. 4Ab s 開始就超過1%的相對誤差.

       西北大學的高老師在操作ELISA試劑盒實驗的時候發現了一個問題,于是來電向恒遠生物銷售人員吳咨詢:加完顯色液(購買)顯色一定時間后,再加終止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發現兩次測得的吸光度值發生衰減。第二次均小于次。

        并且,加終止液時,從*條加到第12條后,測試發現,吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標板都是同一種產品,并且包被相同蛋白。

       高老師向吳詳細的說明了實驗中出現的情況,吳對實驗的問題有了一定的了解,隨后安排技術人員為高老師溝通,為其解決這一問題,高老師恍悟道:原來ELISA吸光度值衰減這樣處理就可以啦。

       其實具體的原因也很簡單,有可能是顯色液的質量不夠好。一般情況下,終止反應后OD值的下降前期不是很明顯。終止后,吸光度值是會隨著時間衰減,所以一般是加完終止液后立即測,這樣比較準。

    再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是:
    ① 顯色時間調整,如果您現在的顯色時間是10MIN,那調整到30MIN,再加終止液,觀察上述現象是否出現。

    ② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。
    ELISA試劑盒顯色時間是30分鐘,終止后要求在30分鐘內檢測,加入終止液后,在加入終止液后2到3分終內檢測,這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。

       上海遠慕ELISA試劑盒采用進口材料生產,專業的酶免專家,提供免費代測,數據分析,技術服務。產品遠銷全國各地。多年以來我們以極其苛刻的要求控制產品的質量,堅持生物科學研究與世界同步的理念。因此也得到了全國各大醫院院校、*醫院、研究所,科研機構等單位的一致認可,并發表了多篇文獻。咨詢訂購!

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