初次做凋亡，一般按照試劑盒說(shuō)明書(shū)做即可，但要附上陽(yáng)性對(duì)照。根據(jù)結(jié)果進(jìn)行對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程調(diào)整。我個(gè)人認(rèn)為試驗(yàn)過(guò)程中tunel酶反應(yīng)的時(shí)間、過(guò)氧化氫的滅活時(shí)間、DAB染色時(shí)間、蘇木素復(fù)染時(shí)間、PBS浸洗時(shí)間等都可以通過(guò)上次試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行微調(diào)從而使試驗(yàn)染色達(dá)到j(luò)ia
菌膜測(cè)定方法：
1、將待測(cè)硅酸鹽玻璃試管或聚苯乙烯96孔板中的菌液小心地倒掉；
2、用自來(lái)水柔和地沖洗，將殘余的培養(yǎng)基及游離細(xì)胞洗去，倒置片刻，將殘留的液體滴干；
3、加入與發(fā)酵液（是培養(yǎng)基嗎？）等體積的結(jié)晶紫染色液，應(yīng)沒(méi)過(guò)細(xì)菌生物膜產(chǎn)生界面（生物膜產(chǎn)生界面在哪），輕柔振蕩，染色30min；
4、傾去染色液，用自來(lái)水柔和地沖洗1-2次，倒置片刻，將殘留的液體滴干；
5、加入與染色液等體積的脫色液（脫色液是什么啊？），輕柔振蕩，脫色15min；
6、將脫色液定容（如何定容？），用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，波長(zhǎng)為570nm，記錄結(jié)果。
弧菌生長(zhǎng)曲線：
1、以終濃度為102CFU/ml（如何制作一個(gè)這樣濃度的細(xì)菌？）分別接種各弧菌2216E培養(yǎng)基中，28℃靜置培養(yǎng)，每隔3小時(shí)取樣，用分光光度計(jì)測(cè)OD值，波長(zhǎng)為600nm。
免疫組化染色影響因素
影響免疫組化染色質(zhì)量的因素有很多，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意組織的取材和固定，選擇質(zhì)量好的商品化抗體，恰當(dāng)?shù)剡x擇和使用封閉和抗原修復(fù)手段，嚴(yán)格的技術(shù)操作和對(duì)照等。
1。假陰性反應(yīng)可發(fā)生在：
1) 組織內(nèi)待測(cè)抗原已被分解破壞，或抗原含量過(guò)低；
2) 抗原被遮蓋，多由于醛類固定劑的使用，使組織中的大分子蛋白借醛鍵形成交聯(lián)而遮蓋待檢抗原；
3) 抗體質(zhì)量不佳或稀釋度不當(dāng)；
4) 技術(shù)操作失誤等。
2．假陽(yáng)性反應(yīng)可發(fā)生在：
1) 抗體與非待檢抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，在使用多克隆抗體時(shí)易出現(xiàn)；
2) 組織對(duì)抗體的非特異性吸附，特別是在有大片組織壞死或組織中有較多富于蛋白的液體時(shí)容易發(fā)生；
3) 內(nèi)源性過(guò)氧化酶的作用，在脾臟、骨髓及一些炎性病變組織的染色中易出現(xiàn)；內(nèi)源性堿性磷酸酶的作用，特別是腸黏膜上皮和腎近曲小管的刷狀緣有高濃度的堿性磷酸酶，若處理不*，易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
4) 判斷失誤，將腫瘤組織中殘留的正常組織的免疫組織化學(xué)陽(yáng)性信號(hào)誤認(rèn)為是腫瘤的染色反應(yīng)；
5) 當(dāng)腫瘤浸潤(rùn)破壞正常組織時(shí)，使被破壞的正常細(xì)胞胞漿內(nèi)的可溶性蛋白釋放，后者被腫瘤細(xì)胞非特異吸附或吞噬，使瘤細(xì)胞出現(xiàn)該種抗原的陽(yáng)性反應(yīng)；⑥外源性和內(nèi)源性色素的干擾。
