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  • 上海遠慕生物科技有限公司

    酵母計數(shù)和活性怎么測? 用它!
    點擊次數(shù):1116 更新時間:2020-07-01

    酵母菌簡介:

    酵母菌是基因克隆實驗中常用的真核生物細胞,也是食品工藝中常用的微生物,如釀酒酵母。

    酵母菌細胞寬度(直徑)約2~6μm,長度5~30μm,有的則更長,個體形態(tài)有球狀、卵圓、橢圓、柱狀和香腸狀等。由于其尺寸較小,形狀不規(guī)則,因此采用明場法無法進行準確的計數(shù),更不易進行酵母活性的檢測!

    ?采用雙熒光通道設計的細胞計數(shù)儀,可更加準確地進行細胞計數(shù)和細胞活性分析。


    接下來我們看一下它是如何進行酵母計數(shù)和活性檢測的吧?

    步驟一:FDA/PI染色

    取1?l FDA試劑、1?l PI試劑加入到18?l酵母菌液中,避光孵育10min。

    FDA/PI試劑染色原理介紹:FDA是一種非熒光性疏水性熒光素衍生物,它可以穿透細胞膜進入細胞,通過細胞內酯酶催化水解二乙酸酯基團產生具有高熒光強度的熒光素。因此活細胞具有綠色熒光。無活性的死細胞被PI著色,發(fā)出紅色熒光。因此,可以很好的辨別死細胞與活細胞,準確的進行細胞活性的檢測。

    步驟二:上樣

    用移液槍吸取10?l 樣品加入到細胞計數(shù)板中。

    將細胞計數(shù)板插入到LUNA FL中。

    步驟三:檢測

    直接點擊內置的酵母檢測App

    在明場下進行調節(jié)焦距,然后點擊Count即開始細胞檢測,30秒內即可完成。

    步驟四:結果查看、分析、導出

    結果查看:

    我們可以得到Total /Live /Dead細胞數(shù)量、細胞活性、細胞平均尺寸等數(shù)據(jù)。

    結果分析:

    我們可以設置細胞分析的尺寸范圍以及聚團情況等。

    結果導出:

    點擊Save/Print即可將結果導出,您可以選擇保存3個通道的原始圖片、加了Tag的圖片、包含了該次檢測所有信息的PDF文件。
     

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