做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)用到血清，當(dāng)血清用不完我們會(huì)凍起來(lái)下次再次使用。但你有沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有時(shí)候在融化血清過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì)，出現(xiàn)這種情況是否血清出現(xiàn)問(wèn)題了呢？
首先我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么，沉淀物其實(shí)包含含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1-2分鐘）或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里（一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾）。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失。
那怎么才能降低沉淀物的發(fā)生呢？
（1）解凍血清/分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
（2）勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。
（3）血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
使用時(shí)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法：
一、保存血清-好的方法?
血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
二、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
三、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
1.解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2.解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生
3.請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
5.若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。
四、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?
欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。
