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  • 上海遠慕生物科技有限公司

    關于紅細胞裂解液的使用說明
    點擊次數:807 更新時間:2022-11-28

    紅細胞裂解液的作用原理
    氯化銨是紅細胞裂解液的主要效應物質,氨根離子不能通過細胞膜,而其他離子可以通過,造成細胞內外的離子濃度差異,形成了滲透壓差,外部的水分會擴散至細胞內,使紅細胞膨脹,達到裂解的效果。

    紅細胞裂解液.jpg

    一、組織細胞樣品:
    1.新鮮組織經胰/酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液,離心棄去上清液;
    2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入3-5ml裂解液),輕輕吹打混勻;
    3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;
    4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次;
    5.如裂解不完/全可重復步驟2和3;
    6.重懸細胞,用于后續實驗;如提取RNA,最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液中進行。

    二、血細胞:
    1.新鮮抗凝血,離心棄去上清液;
    2.取出4℃冰箱預冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細胞壓積加入6-10ml裂解液),輕輕吹打混勻;
    3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液;
    4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或無血清培養液離心洗2-3次;
    5.如裂解不完/全可重復步驟2和3;
    6.重懸細胞,用于后續實驗;如提取RNA,最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液進行。

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