遠(yuǎn)慕生物：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
點(diǎn)擊次數(shù)：1200 更新時(shí)間：2016-08-12
遠(yuǎn)慕生物：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法，實(shí)驗(yàn)成本低，可以用來(lái)檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞樣品
試劑、試劑盒無(wú)血清培養(yǎng)基PBS
儀器、耗材6孔板marker筆直尺槍頭
抗體Hamster IgG3, λ抗體
Hamster IgG3, λ抗體
Hamster IgG3, λ抗體
實(shí)驗(yàn)步驟
一.準(zhǔn)備：
所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺(tái)內(nèi)）
二.流程：
1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃?rùn)M線(xiàn)，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線(xiàn)。
2.在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過(guò)夜能鋪滿(mǎn)。
3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線(xiàn)劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次，去處劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6，12，24小時(shí)取樣，拍照。
