年初《Nature》雜志展望 2018 年生物醫(yī)學(xué)技術(shù)突破，作為「technology to watch in 2018」——質(zhì)譜流式細胞技術(shù)（CyTOF），很多國內(nèi)外大咖已經(jīng)聚焦這項技術(shù)。質(zhì)譜流式技術(shù)（CyTOF）可以對數(shù)百萬細胞進行超過 40 個參數(shù)的單細胞分析，讓研究更加全面、深入。
質(zhì)譜流式
與傳統(tǒng)流式技術(shù)相比，質(zhì)譜流式采用非放射性的穩(wěn)定重金屬同位素作為抗體的標簽，達到同時測量單細胞中多個靶點的目標，高純度金屬同位素確保了低的背景以及小的信號重疊。
質(zhì)譜流式原理
質(zhì)譜流式技術(shù)需要用到金屬偶聯(lián)標記的抗體。抗體質(zhì)量，尤其是特異性是后續(xù)實驗成功的關(guān)鍵。使用經(jīng)過嚴格標準驗證的抗體，能大大提高實驗成功率。
質(zhì)譜免疫組化
基于 CyTOF 技術(shù)，質(zhì)譜流式成像技術(shù) Imaging Mass Cytometry™ 將質(zhì)譜流式（CyTOF）超高檢測通道數(shù)量的優(yōu)勢在組織成像研究中大化，其性能遠遠超越了傳統(tǒng)的免疫組化或者免疫熒光技術(shù)。目前通過單次掃描即可獲得組織切片樣本上 4-37 種蛋白標記物的圖像數(shù)據(jù)，準確反映了蛋白及對應(yīng)的細胞在組織微環(huán)境中的表型和相互關(guān)系等多方面綜合全面的信息，特別是針對一些珍貴的 FFPE 樣本或冰凍組織切片，可以在亞細胞水平進行更深入的分析。
1、這么牛的技術(shù)對抗體有什么要求嗎？
一般而言，常規(guī)的一抗，儲存液中都包含BSA、甘油、等可能會干擾部分偶聯(lián)標記化學(xué)反應(yīng)的成分。這些干擾成分在常規(guī)的無需對抗體進行改造的實驗中能提高抗體的穩(wěn)定性、降低移液損失和冰凍造成的效價降低。但是在抗體偶聯(lián)標記類實驗（包含金屬標記反應(yīng)）中可能會造成標記效率降低的問題。所以，CyTOF 需要無載體緩沖液的抗體形式，不包含 BSA、甘油、疊氮鈉等可能干擾重金屬標記反應(yīng)的抗體緩沖液。
2、CST 是否可以提供 CyTOF 定制抗體？
CST 可以提供這種定制形式的抗體可直接儲存在 PBS 緩沖液中，并且可以定制成更高抗體濃度（部分可能以 >1 mg/ml 濃度提供）的產(chǎn)品，便于后續(xù)進行偶聯(lián)標記反應(yīng)。
3、如何提高 CST 的抗體做 CyTOF 的成功率？
雖然目前質(zhì)譜流式技術(shù)不在 CST 標準內(nèi)部應(yīng)用驗證流程中，如果您遵循以下建議，很有可能提高該實驗的成功率。
若采用 Helios™ 平臺進行實驗，可優(yōu)先考慮從 CST 的 Flow 驗證過的抗體目錄中進行選擇。
若采用 Imaging Mass Cytometry™ 平臺，您選擇的抗體應(yīng)與樣品制備方法相匹配。對于石蠟切片樣品，可優(yōu)先考慮從 CST 的 IHC-P 或 IF-P 應(yīng)用驗證的抗體目錄中進行選擇。對于冷凍組織切片，可優(yōu)先考慮從 CST 的 IF-F 或 IHC-F 應(yīng)用驗證的抗體目錄中進行選擇。
