經(jīng)常有用戶(hù)反映“細(xì)胞凍存與復(fù)蘇遇到了問(wèn)題”，“如何握住原力，讓你的細(xì)胞乖乖沉睡又滿(mǎn)血復(fù)活？”
遠(yuǎn)慕生物為此做了以下總結(jié)：
選 好 細(xì) 胞 凍 存 液 是 基 礎(chǔ)
使用動(dòng)物血清常常會(huì)遇到很多問(wèn)題，例如：病毒感染、其他動(dòng)物源的污染。使用無(wú)血清制品培養(yǎng)與凍存細(xì)胞，可以消除這方面的隱患。此外，無(wú)血清凍存液可以確保細(xì)胞在化學(xué)成分固定的條件下生長(zhǎng)，更進(jìn)一步確保細(xì)胞凍存時(shí)的條件穩(wěn)定。
慢 慢 做 冷 凍
若您養(yǎng)的是貼壁細(xì)胞，請(qǐng)先將細(xì)胞消化下來(lái)；若是懸浮細(xì)胞，請(qǐng)直接按以下步驟進(jìn)行：
1. 以200-300g離心3分鐘，棄去上清，收集細(xì)胞。
2. 用BI無(wú)血清凍存液將細(xì)胞重懸（不需回溫），將細(xì)胞密度調(diào)整為3~5x106 cells/ml，添加到凍存管中（一般每管1ml）。
3. 建議將含有細(xì)胞懸液的凍存管放進(jìn)漸進(jìn)降溫盒或是保溫杯中，置于-80°C冰箱6小時(shí)以上或是過(guò)夜（或不需要程序降溫)。
4. 將凍存管迅速移到液態(tài)氮中保存。
5. 凍存24小時(shí)后，建議檢測(cè)細(xì)胞存活率。
細(xì) 胞 復(fù) 蘇 要 迅 速
1. 將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出，置于室溫回溫，不用水浴溶解。此時(shí)可準(zhǔn)備新鮮培養(yǎng) 基、無(wú)菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。
2. 在生物安全柜內(nèi)，直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融，使細(xì)胞團(tuán)塊化凍。
3. 先在無(wú)菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細(xì)胞。
4. 倒去上清液，重懸細(xì)胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
BI無(wú)血清細(xì)胞凍存液
不含動(dòng)物成份
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后，平均活細(xì)胞回收比例超過(guò)90%
Serum-Free Cell Freezing Medium
無(wú)血清細(xì)胞凍存液，無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)該使用無(wú)血清的凍存液保存，以保持無(wú)血清培養(yǎng)體系的完整。本凍存液不含蛋白及動(dòng)物組分，主要成分為DMSO和甲基纖維素。
Cryostem ACF Freezing Media
無(wú)血清干細(xì)胞凍存液（Optimized for Stem Cell），CryoStem對(duì)所有種類(lèi)的細(xì)胞都有非常好的凍存效果，該產(chǎn)品經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，特別適用于人胚胎干細(xì)胞和人原代細(xì)胞的凍存。用CryoStem凍存融解后，細(xì)胞表現(xiàn)出ji佳的復(fù)蘇率、生長(zhǎng)活性、貼壁性和傳代能力。
MSC Freezing Medium
無(wú)血清間充質(zhì)干細(xì)胞凍存液，即用型溶液，特別適用于人類(lèi)間充質(zhì)干細(xì)胞凍存，用MSC凍存液凍存融解后，細(xì)胞表現(xiàn)出ji佳的復(fù)蘇率、生長(zhǎng)活性。
