細胞培養(yǎng)怕支原體污染，但有一些被污染的細胞不能被丟棄時該怎么辦？接下來一起來了解一下吧
如何祛除細胞上的支原體污染？
據研究表明，約98％的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm，比細胞小很多，經低速離心與細胞分離。通過反復懸浮沖洗、離心，加上使用我們的Zell Shield，即可在細胞培養(yǎng)四代以內有效地祛除支原體。
什么是Zell Shield？
Zell Shield是一種鏈青mei素類復合抗生素，對細胞影響很小，可以有效抑制細胞培養(yǎng)中的支原體、細菌、霉菌、真菌等微生物增殖。普通的鏈mei素、青mei素對支原體沒有效果。
具體是怎么操作呢？
1.首先把被支原體污染的細胞消化下來，放入離心管離心，棄上清。再加入干凈的PBS懸浮沖洗細胞、低速離心（300~500r/min）、棄上清，反復三次。這樣可祛除細胞表面60％~70％的支原體，支原體還剩約30％~40％.
2.細胞加入含1％Zell Shield的新鮮培養(yǎng)基，傳代培養(yǎng)。這時因培養(yǎng)基中Zell Shield的抑制作用細胞培養(yǎng)過程中，雖然細胞增殖，但殘留的支原體無法增殖。細胞需再次傳代時，把第二代細胞消化下來，離心，棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，反復三次，這時，細胞上殘留的支原體大約已剩余為初污染量的10％左右。
3.細胞加入含1％Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基，傳代培養(yǎng)。需再次傳代時把第三代細胞消化下來，離心，棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，反復三次，可再次祛除60％~70％的殘余支原體，通過沖洗、抑制、換液等操作，細胞中支原體的殘留污染量大約只剩3％左右。
4.細胞加入含1％Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基，傳代培養(yǎng)。
需再次傳代時把第四代細胞消化下來，離心，棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，反復三次，可再次祛除60％~70％的支原體，此時，支原體殘留量大約已低于1％.支原體的增殖亦有密度要求，用Zell Shield處理過四代的細胞，即便撤掉Zell Shield，只要保證沒有新的支原體人為再次帶入，原有支原體也無法再增殖，隨著傳代，換液，支原體的老化、死亡，細胞中的支原體污染基本就徹di解決了。
敲黑板，劃重點啦！
1.每次傳代時，重復三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要，操作要正確、規(guī)范，以達-佳效果！
2.在培養(yǎng)基中加入1％Zell Shield?抑制支原體增殖！
3.使用安全的血清、培養(yǎng)基等試劑，不再有新的支原體加入！
做到以上三點即可確保祛除支原體污染。
Zell Shield工作原理是什么？
支原體祛除劑Zell Shield（培養(yǎng)基用）是一種即用型鏈青mei素類的復合抗生素，在培養(yǎng)基中1%的濃度通過阻止原核生物DNA及蛋白的合成，抑制細胞培養(yǎng)中遇到的細菌、真菌、霉菌增殖，更可以有效、精-確地抑制支原體增殖，且對細胞基本安全。
品名：支原體祛除劑Zell Shield（培養(yǎng)基用）
供應商：遠慕生物
規(guī)格：50mL/瓶
儲存溫度：-18℃
使用注意事項：實驗室初次使用，注意分裝，分裝后的小包裝Zell Shield?仍-20℃避光冷凍保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。
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