一抗和二抗的定義、作用與選擇
點擊次數(shù)：174 更新時間：2025-02-27
一抗和二抗的種屬來源通常是一樣的。在選擇二抗時，通常需要根據(jù)一抗的種屬來源來選擇相應(yīng)的二抗。例如，如果一抗是小鼠源的單克隆抗體，那么二抗應(yīng)選擇抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。
一抗和二抗的定義和作用
一抗（primary antibody）：是一種免疫球蛋白，能夠特異性結(jié)合特定的蛋白，并將其純化、檢測和定量。一抗可以是多克隆抗體（pAb）或單克隆抗體（mAb），分別由多個B細胞克隆產(chǎn)生或由單一B淋巴細胞分泌產(chǎn)生。
二抗（secondary antibody）：直接與靶抗原連接的一抗結(jié)合，通常用于標記和檢測一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段，如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。
選擇二抗時需要考慮的因素
一抗的種屬來源：二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來源。例如，如果一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。
一抗的類別和亞類：二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體；單克隆抗體由于存在不同的亞型，選擇二抗時需要根據(jù)一抗的類型或亞類相匹配。
實驗類型：不同的實驗類型可能需要不同類型的二抗。例如，在雙標實驗中，如果兩個一抗分別來自不同的種屬，則二抗應(yīng)選擇來自第三種種屬的抗體，以避免交叉反應(yīng)。
