【細胞融合技術】以人鼠細胞雜交為例說明
點擊次數(shù)：297 更新時間：2025-03-21
人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶
首先用熒光染料標記抗體∶
將小鼠的抗體與發(fā)綠色熒光的熒光素（fluorescin）結合，人的抗體與發(fā)紅色熒光的羅丹明（rhodamine）結合；
第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合；
最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中，讓這些標記抗體同融合細胞膜上相應的抗原結合。
開始，融合的細胞一半是紅色，一半是綠色。在37℃下40分鐘后，兩種顏色的熒光在融合的雜z種細胞表面呈均勻分布，這說明抗原蛋白在膜平面內(nèi)經(jīng)擴散運動而重新分布。這種過程不需要ATP。如果將對照實驗的融合細胞置于低溫（1℃）下培育，則抗原蛋白基本停止運動。這一實驗結果令人信服地證明了膜整合蛋白的側向擴散運動。
細胞融合關鍵
1．技術上的誤差常常導致融合的失敗。例如，供者淋巴細胞沒有查到免疫應答。這必然要失敗的。
2．融合試驗最大的失敗原因是污染，融合成功的關鍵是提供一個無毒無菌的操作環(huán)境。
